由博鰲國(guó)際醫(yī)院、哈工大生命科技學(xué)院和日本 ISHIN-KAI ODA診所聯(lián)合在AGING（老齡化）雜志發(fā)文：《Immune normalization strategy against suboptimal health status: safe and efficacious therapy using mixed-natural killer cells》（對(duì)抗亞健康的免疫正?；呗裕菏褂肗KM細(xì)胞的安全和有效性治療）。

經(jīng)過(guò)筆者檢索，該文是博鰲樂(lè)城正式發(fā)表的首篇關(guān)于細(xì)胞應(yīng)用的公開(kāi)文獻(xiàn)。該文研究主體分為三部分內(nèi)容。

（1）根據(jù)PDMC（外周血單個(gè)核細(xì)胞）的PD-1的表達(dá)來(lái)定義“亞健康”狀態(tài)；

（2）NKM細(xì)胞輔助治療腫瘤患者；

（3）NKM細(xì)胞應(yīng)用于亞健康人群。

免疫系統(tǒng)是人體抵抗疾病的關(guān)鍵屏障，并受幾個(gè)因素的影響(如遺傳、年齡），免疫細(xì)胞反應(yīng)能力的降低會(huì)導(dǎo)致疾病(例如癌癥)，而免疫細(xì)胞的過(guò)度激活會(huì)導(dǎo)致自身免疫性疾病。因此，免疫系統(tǒng)的平衡對(duì)健康很重要。

陳列平教授等提出了癌癥治療中“免疫正?；钡母拍?/span>。如果個(gè)體免疫力能夠正?；鞣N疾病都有可能預(yù)防。過(guò)去十年細(xì)胞療法的發(fā)展為這一策略的實(shí)施帶來(lái)了希望。細(xì)胞療法，尤其是那些使用免疫細(xì)胞的療法，已被用于癌癥治療，例如使用自然殺傷(NK)細(xì)胞的療法和嵌合抗原受體T細(xì)胞。

近幾十年來(lái)，結(jié)腸直腸癌和肺癌的流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示，癌癥的預(yù)防和早期檢測(cè)遠(yuǎn)比控制癌癥死亡率的治療更有效。免疫細(xì)胞療法在疾病預(yù)防(尤其是癌癥)中的應(yīng)用可以大大減少疾病的發(fā)生或復(fù)發(fā)。對(duì)于長(zhǎng)期免疫功能低下的老年人，免疫細(xì)胞療法可以“重新平衡”他們的免疫系統(tǒng)，消除突變細(xì)胞和病原體(如病毒、細(xì)菌)，從而降低疾病風(fēng)險(xiǎn)。

T細(xì)胞上程序性細(xì)胞死亡蛋白(PD)-1的表達(dá)被認(rèn)為是“免疫衰竭”的標(biāo)志。PD-1在外周血單核細(xì)胞(PBMCs)包括CD4+和CD8+t細(xì)胞上的表達(dá)，已經(jīng)顯示在癌癥、結(jié)節(jié)病和慢性丙型肝炎病毒感染中顯著增加。PD-1屬于免疫細(xì)胞表面的抑制性小分子，在腫瘤患者中常常是高表達(dá)，后果就是抑制了免疫細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷。

下圖是NKM細(xì)胞的制備，實(shí)際是一種混合的免疫細(xì)胞，作者分析了他們培養(yǎng)的NKM細(xì)胞，其中包含約20%的NK細(xì)胞(CD3?CD16/56+)、約30%的NK T樣細(xì)胞(CD3+CD16/56+)，以及其他T細(xì)胞。

體外測(cè)試表明，NKM細(xì)胞的細(xì)胞毒性只有“純”NK細(xì)胞(NK92)的一半，但細(xì)胞毒性比PBMCs高。（如下圖）

作者招募了11例惡性淋巴瘤患者(彌漫性大B細(xì)胞淋巴瘤[7例]、外周T細(xì)胞淋巴瘤[2例]、間變性大細(xì)胞淋巴瘤[1例]和霍奇金淋巴瘤[1例])，這些患者患有原發(fā)性復(fù)發(fā)/難治性治療(1例)、補(bǔ)救性化療后復(fù)發(fā)(8例)或自體干細(xì)胞治療后復(fù)發(fā)(2例)(下圖A)。

每位患者每次接受20–30×10^8NKM細(xì)胞(每2周治療一次)，共完成6次回輸，對(duì)NKM治療的反應(yīng)并不強(qiáng)烈(一例完全反應(yīng)，一例病情穩(wěn)定)，但生活質(zhì)量有了很大提高。

在具有完全反應(yīng)的患者(病例#2)中，在用NKM細(xì)胞治療后，癌灶的數(shù)量顯著減少(下圖B)。靜脈輸注NKM細(xì)胞期間和之后，體溫、血壓和心跳保持穩(wěn)定，未發(fā)現(xiàn)不良反應(yīng)。患者能耐受治療，無(wú)臨床副作用。

另一名患有胰腺導(dǎo)管癌(T4N1M1c)的患者，其癌細(xì)胞已經(jīng)轉(zhuǎn)移，且不能維持化療。作者采用了單倍體相合的NKM細(xì)胞輸注治療該患者(供體是患者的兒子)?；颊呓邮芰?0–30×10^8NKM細(xì)胞，六次治療后，患者表現(xiàn)出良好的治療耐受性，并且腎盂和腹盆腹膜中轉(zhuǎn)移灶的數(shù)量顯著減少（下圖C）).患者的生命體征和身體狀況明顯改善。

這些結(jié)果表明NKM細(xì)胞在癌癥患者中顯示出有效的抗腫瘤活性，NKM細(xì)胞可用于輔助癌癥治療。

NKM細(xì)胞是免疫細(xì)胞類型的混合物，包括Th細(xì)胞(抑制細(xì)胞毒性)和NK細(xì)胞(引發(fā)細(xì)胞毒性)。于是作者探索了NKM細(xì)胞是否在亞健康個(gè)體的免疫正?；斜憩F(xiàn)出更有效的功能。

共招募了四名潛在的亞健康個(gè)體，治療方案如下圖A所示。

每次治療使用大約20×10^8自體NKM細(xì)胞，一個(gè)療程注射三次，每次間隔1個(gè)月。在治療前、第一次注射后和第三次注射后測(cè)量T細(xì)胞中PD-1的表達(dá)。（作者提前定義了CD3+PD-1+細(xì)胞/PBMCs >4%和CD3+CD8+PD-1+細(xì)胞/CD3+CD8+細(xì)胞> 10%為“亞健康個(gè)體”）

從上圖，四位亞健康患者的數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)情況表明，NKM可以降低PBMCs中PD-1的表達(dá)，并實(shí)現(xiàn)亞健康個(gè)體免疫系統(tǒng)的再正?；?/strong>

作者鑒定了NKM細(xì)胞的組成并研究了它們的細(xì)胞毒性，發(fā)現(xiàn)NKM細(xì)胞對(duì)K562細(xì)胞或肝癌細(xì)胞有明顯的細(xì)胞毒性。但是，與癌癥患者體內(nèi)的癌細(xì)胞數(shù)量相比，能夠到達(dá)癌變區(qū)域的NKM細(xì)胞數(shù)量相對(duì)較少，因此抗癌效果有限。盡管該研究隊(duì)列的結(jié)果并不可靠，但顯示了NKM細(xì)胞療法潛在的輔助抗癌功能。后者可能不如使用純NK細(xì)胞的治療有效。然而，由于其易于操作和安全(較少發(fā)現(xiàn)免疫相關(guān)的副作用)，作者認(rèn)為NKM細(xì)胞療法是癌癥患者的有效輔助療法，尤其是與手術(shù)結(jié)合，以改善免疫反應(yīng)和消除殘余癌細(xì)胞。

在本文定義的亞健康個(gè)體中，NKM細(xì)胞療法可以減少PBMCs中PD-1的表達(dá)，并快速恢復(fù)/重新平衡免疫系統(tǒng)。然而，對(duì)于一些個(gè)體(例如，患者C)，可能需要更多的注射或更大劑量的NKM細(xì)胞療法來(lái)降低PBMCs中的PD-1表達(dá)。

該文證明了使用NKM細(xì)胞的新方法作為癌癥患者的輔助治療以及亞健康個(gè)體的治療是安全有效的。通過(guò)NKM細(xì)胞療法使外周免疫系統(tǒng)正常化可以擴(kuò)大其在不同疾病中的應(yīng)用范圍。