一、小鼠實(shí)驗(yàn)方法

實(shí)驗(yàn)前，首先應(yīng)檢查動(dòng)物健康情況，性別、體重等是否符合實(shí)驗(yàn)要求。健康的小鼠應(yīng)該體型勻稱、運(yùn)動(dòng)活潑、被毛濃密有光澤而貼身，常選年齡2～3月，體重20～28g小鼠做實(shí)驗(yàn)。

性別的鑒定主要觀察動(dòng)物肛門與生殖器之間的距離，遠(yuǎn)的為雄性，近的為雌性，并可見有明顯的乳頭。

實(shí)驗(yàn)前，進(jìn)行隨機(jī)分組和編號(hào)標(biāo)記，常用的方法是化學(xué)染料涂染被毛法，特別適用于白色被毛動(dòng)物的標(biāo)號(hào)。涂染時(shí)，可用0.5％中性紅染成紅色，3％～5％苦味酸染成黃色，2％硝酸銀在日光作用下染成咖啡色，煤焦油酒精溶液染成黑色。

一般習(xí)慣黃色涂染左前腿為1，左腰為2，左后腿為3，頭為4，背部為5，尾基為6，右前腿為7，右腰為8，右后腿為9，用紅色表示相應(yīng)的十位數(shù)，以此類推。

抓取時(shí)右手提取尾巴向后拉，左手拇指和食指抓住兩耳和頸部皮膚，置于手心中，無名指按住尾巴，小指按住后腿。

腹腔給藥時(shí)，針先平行刺入下腹部皮下，再向前刺一段后，向下刺入腹腔，回抽一下，如無血時(shí)，即可將藥物注入腹腔。

肌肉給藥時(shí)，將左右腿翻過來，用無名指固定于掌間，把藥液注入臀部肌肉內(nèi)。

灌胃給藥時(shí)，選用6號(hào)灌胃針，沿右嘴角插入，經(jīng)食道進(jìn)入胃內(nèi)，如插入通暢無阻，動(dòng)物不掙扎，即可將藥液徐徐灌入，一次不超過0.9ml。

腦內(nèi)接種時(shí)，選套有塑料管，針尖露出2ml深的針頭，由鼠正中額部刺入腦內(nèi)，注入接種物。

尾靜脈給藥時(shí)，將鼠裝入固定盒內(nèi)，露出鼠尾，摩擦充血后，在尾下1／4處選一根明顯的靜脈，食指和拇指捏住尾巴，用4號(hào)針頭平行血管刺入靜脈，可見有血進(jìn)入針管，即可將藥液注入靜脈。

取少量血做血常規(guī)檢查時(shí)，用針頭刺破尾靜脈，讓血自動(dòng)流出。再取血做血常規(guī)檢查。

眼底靜脈叢采血時(shí)，取一根一端剪尖，內(nèi)徑為1mm的塑料管，從眼角內(nèi)側(cè)向眼后方向刺入3～4mm，即可見血流出。

取較多量血時(shí)，可摘除眼球采血，先壓迫鼠頸部管，使眼球突出，再用彎無鉤鑷，在眼球根部摘除，頭向下迅速提取鼠，將血液流入樣品管內(nèi)。

心臟采血，先在左側(cè)第3～4肋間摸到心搏最強(qiáng)處，用5號(hào)半針頭刺入胸內(nèi)約1cm，當(dāng)針頭刺入心臟，血進(jìn)入針管時(shí)，即可抽取。

雌鼠在發(fā)情周期不同階段，陰道黏膜可發(fā)生典型變化，可用陰道涂片細(xì)胞的改變來反映，用點(diǎn)滴管吸一點(diǎn)生理鹽水，輕輕插入陰道，沖道，沖洗2～3次后吸一些沖洗液做涂片。

脊椎脫臼法是最常用的處死方法，按住鼠頭后，抓住鼠尾用力向后一拉，即可處死。

制作骨髓涂片時(shí)，先剖取胸骨，除去附著的肌肉，選2～3節(jié)處剪開，擠出少許骨髓與同種鼠血清混合涂在玻片上。

二、大鼠實(shí)驗(yàn)方法

大鼠不如小鼠溫順，門齒長(zhǎng)而尖銳，抓取時(shí)為避免咬傷，可帶上帆布手套，右手抓鼠尾向后拉，左手拇指與食指抓住兩耳及預(yù)部皮膚，置于左掌心中。

大鼠給藥途徑和方法與小鼠類似，只是給藥量略大。灌胃時(shí)用8號(hào)灌胃針頭。

采集尿時(shí)，將鼠放入代謝籠內(nèi)飼養(yǎng)，大鼠排出的尿液和糞便可通過籠子底部玻璃制的糞尿分離器將尿和糞分開收集。

麻醉常采用乙酸吸入法，麻醉深度易于掌握，安全度大，麻醉速度快，約5min，便進(jìn)入麻醉狀態(tài)，但蘇醒也快。

將己麻醉的大鼠，背臥法固定于鼠板上。

檢查心電時(shí)，將針電極插在四肢和左側(cè)3～4肋間心搏最強(qiáng)處皮下，按常規(guī)記錄肢導(dǎo)聯(lián)和胸導(dǎo)聯(lián)心電圖。

測(cè)量血壓時(shí)，戊巴比妥鈉麻醉后頸部切口，分離出外頸靜脈，插入細(xì)塑料管，注入1％肝素0.3ml，使體內(nèi)血液肝素化。再分離出頸動(dòng)脈，結(jié)扎遠(yuǎn)心端，用動(dòng)脈夾夾住近心端，剪一小口，向心端方向插入一根盛滿鹽水，尾端有塞子的細(xì)塑料管。拔去塞子，連接在傳感器的塑料接管上，打開動(dòng)脈夾，血壓變化經(jīng)傳感器和放大器，在記錄儀上記錄下血壓變化曲線。正常血壓一般為100～200mmHg。

摘除腎上腺時(shí)，胸腔交界處皮膚常規(guī)消毒，背正中線切開皮膚，左肋緣與脊椎相交處，縱行剪開薄層肌肉，撐開切口，即可露出深紅色的腎臟及其上方呈炎黃色豆形的腎上腺，用特制的環(huán)形眼科鑷將腎上腺摘除。

摘除卵巢時(shí)，手術(shù)方法基本和摘除腎上腺相同，撐開切口，可見位于兩側(cè)腎臟外下方呈淡粉紅色的卵巢及相連的子宮角，在子宮角處穿線結(jié)扎，用環(huán)形眼科鑷將卵巢摘除。

實(shí)驗(yàn)后需要處死鼠時(shí)，除采用小鼠幾種處死方法外，常采用靜脈快速注射25％氯化鉀，每只0.6ml，由尾靜脈或由頸外靜脈注入，使心肌失去收縮力，致心臟弛緩性停跳而立即死亡。

大鼠解剖生理特點(diǎn)之一是無膽囊，而小鼠在肝右上葉和右中葉之間有一淡綠色發(fā)亮的膽囊。

三、家兔實(shí)驗(yàn)方法

家兔的正確抓取方法是右手抓住頸部的毛與皮，提起兔，用左手托住它的臀部，靠在實(shí)驗(yàn)者身上，不正確的抓取方法是：抓兩耳提起動(dòng)物，常損傷兔耳；提兔腰部，可損傷兩側(cè)腎臟。

兔耳采血或給藥時(shí)，將兔裝入固定盒內(nèi)，先固定好頭部，再蓋上固定盒罩。

家兔的耳大，血管清晰，便于注射和采血。

采少量血時(shí)，先摩擦兔耳，使靜脈充血，拔去近耳尖部耳緣靜脈處兔毛，用針頭刺破靜脈，血即可從靜脈破口滴出，也可用注射器抽取。

采較多量血時(shí)，可從兔耳中央動(dòng)脈采血，使血管充血后，用5號(hào)半針頭由中央動(dòng)脈近耳尖部分叉處刺入動(dòng)脈，采血量根據(jù)需要而定。

取大量血時(shí)，可從心臟直接抽取，觸摸左側(cè)第3～4肋間心搏最強(qiáng)處，用6號(hào)針頭垂直刺入胸腔，當(dāng)刺入心臟時(shí)，血可自動(dòng)進(jìn)入注射器，即可抽取。

需要灌胃給藥時(shí)，將兔固定在木制固定盒內(nèi)，左手虎口卡住并固定好兔嘴，右手取14號(hào)細(xì)導(dǎo)尿管，由右側(cè)唇裂避開門齒，將導(dǎo)管慢慢插入，如插管順利，動(dòng)物不掙扎，插入約15cm時(shí)，即表示插入胃內(nèi)，將藥液注入。

采集尿液常用壓迫膀胱法，右手用力擠壓腹部膀胱部位，尿即從尿殖口流出，正常尿是混濁的。

還可采用導(dǎo)尿法，選14號(hào)導(dǎo)尿管，管頭沾些液體石臘，左手拇指和食指扒開生殖器，由尿殖口輕輕將尿?qū)Ч懿迦氚螂?，再抽取尿液?/span>

椎管內(nèi)給藥或抽取腦脊髓液時(shí)，先盡量使兔尾部向腹側(cè)屈曲，摸到腰椎與骶椎之間的間隙，針頭垂直刺入椎管內(nèi)，當(dāng)見到兔的后肢有跳動(dòng)，即證明已插入，不能再向下刺，回抽注射器見有腦脊液流出，再將藥液注入。

家兔麻醉常采用耳緣靜脈注射戊巴比妥鈉，40mg／kg或氨基甲酸乙酯每0.8～1g／kg。

家兔的固定方法可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要而定，簡(jiǎn)便的方法，可用棉線拉住前門齒固定在手術(shù)臺(tái)前面的鐵柱上，也可用馬蹄形頭固定器固定，先將左右兩耳桿固定棒插入外耳道內(nèi)，用門齒固定棒固定在兩門齒的齒縫間，還常用兔頭固定器固定兔頭，再用棉繩將四肢固定在手術(shù)臺(tái)木鉤上。

進(jìn)行頸部手術(shù)時(shí)，先將手術(shù)區(qū)被毛逆毛方向剪去，仔細(xì)分離出頸部皮下的頸外靜脈。

測(cè)量中心靜脈壓時(shí)，在一根盛滿肝素溶液外徑為2mm的塑料管，先預(yù)測(cè)一下由頸外靜脈插口至右心房入口處大約距離，靜脈上剪小口，向心方向慢慢插入6～8cm，即可進(jìn)入右心房小口處，拔去管塞，與壓力傳感器接管相連，并將變化記錄在記錄儀上。

為避免發(fā)生窒息和進(jìn)行人工呼吸，應(yīng)先插好氣管插管。

繼續(xù)分離出頸部的神經(jīng)，靠外側(cè)最初的是迷走神經(jīng)，中間最細(xì)的是減壓神經(jīng)，內(nèi)側(cè)略細(xì)的是交感神經(jīng)，滴加液體石臘，保護(hù)神經(jīng)。

將分離好的減壓神經(jīng)向心端放置在電極上，電極與示波器相連，這是示波器上記錄出的減壓神經(jīng)放電現(xiàn)象。

頸動(dòng)脈血壓由插入動(dòng)脈的套管經(jīng)血壓檢壓計(jì)和壓力傳感器，將血壓變化反映在檢壓計(jì)上，并記錄在三導(dǎo)生理記錄儀上。

實(shí)驗(yàn)中發(fā)生意外，應(yīng)及時(shí)急救。最常用的方法是靜脈或心臟注射強(qiáng)心劑并配合做人工呼吸。

實(shí)驗(yàn)完后，如需要處死動(dòng)物，常采用空氣栓塞處死法，由耳緣靜脈注入40ml空氣，動(dòng)物很快因循環(huán)栓塞而死亡。

四、狗的急性實(shí)驗(yàn)

實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)進(jìn)行健康檢查，經(jīng)訓(xùn)練的狗，不必綁嘴，正常狗鼻濕潤(rùn)，觸之有涼感，眼結(jié)膜和牙齦無出血和感染。

給藥、采血、查體時(shí)，將狗拉上采血臺(tái)，頭用活動(dòng)夾板夾好，下腹部用膠皮管吊起。

檢查脈搏時(shí)，右手伸入股部?jī)?nèi)側(cè)，摸到股動(dòng)脈跳動(dòng)，計(jì)出每分鐘脈搏數(shù)，正常為80～120／min。

胃內(nèi)給藥時(shí)，用12號(hào)灌胃管，左手抓住嘴部，右手中指由右嘴角插入，摸到最后一對(duì)臼齒后的天然空隙，胃管順食管方向不斷插入約20cm，可達(dá)胃內(nèi)，將胃管另一端插入水中，如不出氣泡，表示確已進(jìn)入胃，而沒誤入氣管內(nèi)，即可灌入。

采血時(shí)，常用后肢皮下的小隱靜脈，常規(guī)消毒后，壓迫后肢上端，使靜脈擴(kuò)張，選7號(hào)針頭由分支上端平行血管刺入靜脈，抽取血液。

未經(jīng)訓(xùn)練的狗抓取時(shí)，需要鉗式長(zhǎng)柄捕狗夾，夾住頸部后，拉出飼養(yǎng)房，用棉繩綁住狗嘴，先從下頜繞到上頜打一結(jié)，再繞向下頜打一結(jié)，最后將棉繩牽引到頭后，在脖子上打一活結(jié)。

術(shù)前先行麻醉，常用的方法是靜脈注射戊巴比妥鈉，40mg／kg。

固定四肢時(shí)，將棉繩活扣綁于腕關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)以上部位，將左右前肢的兩條棉繩從背后交叉穿過，再在對(duì)側(cè)前肢的前臂上扎緊固定好。

固定頭時(shí)，先拉出舌頭，再用狗頭固定器將頭固定好。

頸部手術(shù)時(shí)，剪去手術(shù)區(qū)狗毛，自喉頭以下，正中線做大約10cm的皮膚切口，分離出頸部血管和神經(jīng)，測(cè)量血壓時(shí)，先結(jié)扎動(dòng)脈遠(yuǎn)心端，動(dòng)脈夾夾住近心端，剪口，向心方向插入導(dǎo)管。

將電磁血流量計(jì)探頭與頸動(dòng)脈平行，并卡入槽內(nèi)，測(cè)量血流量。將測(cè)量心電圖用的針電極插入四肢、胸部皮下。

股部手術(shù)分離血管神經(jīng)時(shí)，在股三角處做長(zhǎng)約5cm的斜切口，止血、結(jié)扎、分離皮下組織，并逐步分離出股神經(jīng)、股靜脈、股動(dòng)脈，股靜脈插管后，連接輸液裝置，可進(jìn)行輸液。股動(dòng)脈插管后可放血或測(cè)壓用。

開胸前，插好氣管套管，先剪一倒T形切口，然后插入套管，連接在電動(dòng)人工呼吸器上，調(diào)節(jié)通氣量后，進(jìn)行人口呼吸。

沿左側(cè)第四肋間做約8cm切口，用電烙器切開皮下組織、肋間肌肉，打開胸腔，再烙開心包膜，暴露心臟。找到主動(dòng)脈，肺動(dòng)脈，冠狀動(dòng)脈。將電磁血流量計(jì)探頭卡放在主動(dòng)脈根部，在四導(dǎo)記錄上，記錄出主動(dòng)脈血流量。

實(shí)驗(yàn)后，可采用動(dòng)脈急性放血、靜脈注入空氣或氯化鉀、氣胸等方法處死動(dòng)物。

尸檢時(shí)，先檢查口腔、舌和體表有無出血與感染。

沿下頜中線向下至恥骨聯(lián)合，切開皮膚，剝離皮下組織，剪開腹壁肌肉，暴露腹腔，沿第二肋骨開始到肋弓，切除兩側(cè)肋軟管，取下胸骨。

檢查腹腔內(nèi)有無積液和出血，各臟器是否正常。觀察脾臟內(nèi)有無積液，心肺有無粘連和出血。

臟器摘除，采用部分臟器聯(lián)合取出法，先夾住十二指腸，在兩肋問切斷腸端，取下小腸至直腸的全部腸管。取出肝、脾、腎、胃，最后取出心肺。

對(duì)主要胸腹腔臟器進(jìn)行檢查，依次觀察心肺、氣管、食道、肝、脾、腎、腎上腺、胰腺。

按血流方向剖開心臟，由腔靜脈沿心室右緣經(jīng)心尖部和右室前壁，至肺動(dòng)脈，再?gòu)姆蝿?dòng)脈沿左房，經(jīng)心尖部和室中隔，至主動(dòng)脈。這是從腔靜脈剖至右室心尖部，從左室心尖部沿室中膈剪至主動(dòng)脈，分別檢查瓣膜是否正常。

沿腎臟外側(cè)緣正中，向腎門做縱行切開，觀察皮質(zhì)、髓質(zhì)和腎盂有無病變，腎纖維膜是否容易剝離。

用腸切開器剖開腸管，進(jìn)行檢查。

五、狗的慢性實(shí)驗(yàn)

著重介紹無菌手術(shù)技術(shù)。術(shù)前先脫毛，常用的脫毛劑為硫化堿。

將硫化堿放入熱水中溶化，配成10％～20％濃度，用碘酒標(biāo)明脫毛區(qū)域，帶上耐酸堿手套，均勻涂沾脫毛劑，數(shù)分鐘后，毛呈黏糊狀時(shí)，迅速用來蘇水沖洗干凈。

麻醉后，仰臥位固定于手術(shù)臺(tái)上，皮膚常規(guī)消毒后，手術(shù)臺(tái)四周鋪上剖腹單。

用刀背劃出腹中皮膚切口標(biāo)志線，并劃出三條皮膚對(duì)合線，備術(shù)后皮膚縫合用，做長(zhǎng)約10cm皮膚切口。

分離皮下組織，結(jié)扎止血，切開膜直肌前鞘，順肌纖維方向鈍性分開腹直肌，暴露腹直肌后鞘和腹膜。

用止血鉗夾持后鞘及腹膜，確實(shí)沒有夾住腹內(nèi)臟器時(shí)，于兩鉗間切一小口，用止血鉗夾住腹膜切口兩側(cè)，然后向上、下剪開腹膜。

進(jìn)入腹腔，進(jìn)行各種腹腔手術(shù)。

手術(shù)完后，用止血鉗夾住腹膜切口兩側(cè)及上、下角，連續(xù)縫合腹膜。

用8字縫合或間斷縫合腹直肌及前鞘。

對(duì)好皮膚對(duì)合線，先用間斷垂直褥式縫合中間對(duì)合線的皮膚，再間斷縫合皮膚，縫合完畢，壓迫止血后用敷料包扎好傷口。

六、其他動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法簡(jiǎn)介

1．抓蛙時(shí)，左手將其背靠著手心固定位，把后肢拉直，并用左手的中指、無名指及小指夾住，前肢可用拇指及食指壓住。

用布包裹全蛙，露出頭部，左手抓取蛙，右手拇、食指夾住蛙頭，并使其向后彎曲，凹陷處即是枕骨大孔，將針刺入枕骨大孔，并向尾方刺入脊椎管內(nèi)，破壞脊髓，再轉(zhuǎn)向頭方，刺入顱腔，搗毀腦髓，如腦脊髓破壞完全，蛙四肢松軟。

離體灌注的蛙心制備，先剪去胸部皮膚及胸骨，再剪開心包，暴露心臟，繞動(dòng)脈穿線，將心翻至腹側(cè)，在腔靜脈與靜脈竇交界處結(jié)扎，在動(dòng)脈干上剪一小口，將灌有灌注液的蛙心套管，插入開口經(jīng)主動(dòng)脈瓣進(jìn)入心室，打結(jié)結(jié)扎，剪去心臟周圍組織，取出心臟。

將細(xì)導(dǎo)線插入蛙心室肌，并與三導(dǎo)生理記錄相連，心跳變化即可描記下來。

2．抓取豚鼠時(shí)，先用手掌迅速扣住背部，抓住其肩胛上方，用拇指捏住頸部，拿起動(dòng)物，以另手托其臀部固定住后肢。

麻醉后，在耳后作耳蝸管暴露術(shù)，將電極線夾在耳蝸管處，并與放大器、示波器相連，在示波器熒光屏上，可見到耳蝸管放電變化。

3．抓取貓時(shí)，右手抓住貓頭背部皮膚，頭向上抬，左手托住下腹部。

麻醉后，用立體定位儀將貓腹臥位固定好，沿頭部正中切開皮膚，分開頸肌，沿矢狀縫處側(cè)剪開頭骨，暴露腦膜，在顯微鏡觀察下將細(xì)玻璃電極插入至腦干，觀察變化。

4．捕抓猴時(shí)，先用短柄網(wǎng)罩住猴，由罩處抓住猴的頸部，掀開網(wǎng)罩，再提取猴的手臂，反背握住。

麻醉常用肌內(nèi)注射硫噴妥鈉，35mg／kg。

獼猴的口腔解剖生理特點(diǎn)相似于人類，常用于口腔矯形科學(xué)的研究。

采用不同的充填材料和治療方法，進(jìn)行根管治療，觀察牙體的病變和愈合情況。