第八章 熒光免疫技術(shù)

（答案及解析見文末）

一、A1

1、目前應(yīng)用最廣泛的熒光素為（）。

A、異硫氰酸熒光素FITC

B、四乙基羅丹明RB200

C、四甲基異硫氰酸羅丹明

D、鑭系螯合物

E、藻紅蛋白R(shí)-BE

2、免疫熒光顯微技術(shù)中，特異性最高，非特異性熒光染色因素最少的方法是（）。

A、直接法

B、間接法

C、補(bǔ)體結(jié)合法

D、雙標(biāo)記法

E、多標(biāo)記法

3、作為熒光抗體標(biāo)記的熒光素必須具備的條件中，可以提高觀察效果的是（）。

A、必須具有化學(xué)上的活性基團(tuán)能與蛋白穩(wěn)定結(jié)合

B、性質(zhì)穩(wěn)定不會(huì)影響抗體的活性

C、熒光效率高，熒光與背景組織色澤對(duì)比鮮明

D、與蛋白質(zhì)結(jié)合的方法簡(jiǎn)便快速

E、與蛋白質(zhì)的結(jié)合物穩(wěn)定

4、熒光抗體試驗(yàn)所沒(méi)有的類型是（）。

A、直接法

B、間接法

C、補(bǔ)體結(jié)合法

D、間接抑制法

E、雙標(biāo)記法

5、要使熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比，應(yīng)使（）。

A、激發(fā)光必須很強(qiáng)

B、樣品濃度應(yīng)適中

C、待測(cè)物吸光系數(shù)必須很大

D、光源與檢測(cè)器應(yīng)與樣品在同一線上

E、液槽厚度要足夠厚

6、下列有關(guān)直接法熒光抗體染色技術(shù)的敘述，錯(cuò)誤的是（）。

A、簡(jiǎn)單易行，特異性好

B、敏感性較間接法差

C、可對(duì)抗原或抗體作檢測(cè)

D、檢測(cè)一種抗原需要制備一種熒光抗體

E、結(jié)果直觀，易于判斷

7、熒光抗體染色技術(shù)中，只制備一種標(biāo)記抗體，卻可檢測(cè)幾乎所有的抗原抗體的方法是（）。

A、直接法

B、間接法

C、補(bǔ)體結(jié)合法

D、雙標(biāo)記法

E、混合法

8、熒光效率是指（）。

A、熒光色素將吸收的光能轉(zhuǎn)變?yōu)闊晒獾陌俜致?/p>

B、熒光色素產(chǎn)生熒光的強(qiáng)度

C、接受激發(fā)光后，熒光物質(zhì)所產(chǎn)生的熒光的色調(diào)

D、特異性熒光和非特異性熒光的強(qiáng)度比

E、物質(zhì)產(chǎn)生熒光的效率

答案部分

一、A1

1、

【正確答案】 A

【答案解析】

2、

【正確答案】 A

【答案解析】熒光抗體染色技術(shù)直接法：用將特異熒光抗體直接滴加于標(biāo)本上，使之與抗原發(fā)生特異性結(jié)合，本法優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，特異性高，非特異性熒光染色因素最少，缺點(diǎn)是敏感度偏低，每檢查一種抗原需制備相應(yīng)的特異熒光抗體。不可對(duì)抗原或抗體作檢測(cè)。

3、

【正確答案】 C

【答案解析】作為標(biāo)記的熒光素應(yīng)符合以下要求：①應(yīng)具有能與蛋白質(zhì)分子形成共價(jià)健的化學(xué)基團(tuán)，與蛋白質(zhì)結(jié)合后不易解離，而未結(jié)合的色素及其降解產(chǎn)物易于清除。②熒光效率高，與蛋白質(zhì)結(jié)合后，仍能保持較高的熒光效率。③熒光色澤與背景組織的色澤對(duì)比鮮明。④與蛋白質(zhì)結(jié)合后不影響蛋白質(zhì)原有的生化與免疫性質(zhì)。⑤標(biāo)記方法簡(jiǎn)單、安全無(wú)毒。⑥與蛋白質(zhì)的結(jié)合物穩(wěn)定，易于保存。其中，②③與提高觀察效果有關(guān)。

4、

【正確答案】 D

【答案解析】熒光抗體試驗(yàn)的類型包括：直接法、間接法、補(bǔ)體結(jié)合法和雙標(biāo)記法。

5、

【正確答案】 B

【答案解析】要使熒光強(qiáng)度與熒光物質(zhì)的濃度成正比，應(yīng)使樣品的濃度適中。

6、

【正確答案】 C

【答案解析】熒光抗體染色技術(shù)直接法是用特異熒光抗體直接滴加于標(biāo)本上，使之與抗原發(fā)生特異性結(jié)合。本法的優(yōu)點(diǎn)是操作簡(jiǎn)便，特異性高，結(jié)果直觀，易于判斷，非特異性熒光染色因素最少，缺點(diǎn)是敏感度偏低，每檢查一種抗原需制備相應(yīng)的特異熒光抗體。不可對(duì)抗體作檢測(cè)。間接法可用于檢測(cè)抗原和抗體。

7、

【正確答案】 B

【答案解析】熒光抗體染色法中，間接法可用于檢測(cè)抗原和抗體。本法有兩種抗體相繼作用，第一抗體為針對(duì)抗原的特異抗體，第二抗體（熒光抗體）為針對(duì)第一抗體的抗抗體。本法靈敏度高，而且只制備一種標(biāo)記抗體，卻可檢測(cè)幾乎所有的抗原抗體系統(tǒng)。

8、

【正確答案】 A

【答案解析】熒光分子不能將全部吸收的光能都轉(zhuǎn)變成熒光，總或多或少地以其他形式釋放。熒光效率指熒光分子將吸收的光能轉(zhuǎn)變成熒光的百分率，與發(fā)射熒光光量子的數(shù)值成正比。

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