張卉 太原市中心醫(yī)院

眾所周知, 血液一般檢驗(yàn)在臨床上是一種常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)目,它工作量大, 標(biāo)本多, 對(duì)臨床的診斷、治療產(chǎn)生著重要的影響。因此, 對(duì)檢驗(yàn)質(zhì)量的控制成為我們工作中的重要任務(wù), 特別是在血常規(guī)檢測(cè)中對(duì)細(xì)胞形態(tài)觀察尤為重要, 血涂片制作和染色效果的好壞直接影響血細(xì)胞的觀察繼而關(guān)系著檢驗(yàn)的結(jié)果。

1 玻片的清洗

將玻片放入肥皂或洗衣粉中煮沸 20 min; 用熱水將肥皂和血膜等污物洗去, 用自來水反復(fù)沖洗, 再用蒸餾水沖洗 3 次～5 次。必要時(shí)再置 95% 酒精浸泡 1 h, 然后擦干或烘干備用.新玻片先置 95% 酒精浸泡或 10% 鹽酸浸泡 24 h, 然后用水徹底清洗。

2 標(biāo)本的采集

首先用 75% 酒精將無名指消毒待酒精干后, 刺破皮膚, 使血液自然流出, 切勿用力擠壓。取干凈載片, 讓血滴在離載片 4mm ～5 m m 處, 注意手指持握載片的邊緣, 勿觸及其表面, 不能使載片接觸取血部位的皮膚, 取血后要迅速推片以防血液凝固, 如果從抗凝管取血?jiǎng)t血液必需新鮮, 否則造成血細(xì)胞的破壞。

3 血涂片的制備

玻片要求: 1. 0 mm×26 mm ×( 76±0. 5) mm; 推片要求:推片邊緣整齊、平滑; 血涂片的好壞與血滴大小、推片角度、推片速度直接有關(guān), 推片時(shí), 血滴愈大, 角度愈大, 推片速度愈快則血膜愈厚, 反之血膜愈薄, 血膜分布不勻主要是推片不齊用力不均, 玻片不潔所致。制作一張均勻的血涂片必需用力均勻,角度始終不變, 如果用力太輕, 則涂抹膜太厚無法觀察且不能推第二次; 用力太重又會(huì)損傷血細(xì)胞。制成后可在空氣中揮動(dòng)使其迅速干燥, 以免血細(xì)胞皺縮。同時(shí)血膜干燥后, 最好立即固定染色, 避免細(xì)胞遭受污染而使之溶解, 久放后效果不佳; 血膜片要求: 血膜均勻, 薄如蟬翼, 尾端形如弧狀, 血膜具有頭體尾不同厚薄區(qū)域。注意考慮患者的血液狀態(tài), 如貧血程度, 血液黏稠度, 白細(xì)胞或有核細(xì)胞多少等因素, 調(diào)整推片技巧。

4 血涂片染色

目前市售瑞氏快速染液對(duì)觀察細(xì)胞形態(tài)快而清晰, 但是染液往往破壞紅細(xì)胞, 因此必須用傳統(tǒng)的瑞氏染液先覆蓋在血膜上, 再加入快速瑞氏染液, 最后加入緩沖液, 其量要充足并充分混勻。染色時(shí)間: 在夏季緩沖液和染液易多一些, 時(shí)間相對(duì)要短一些, 否則染液很快蒸發(fā), 染料沉積于細(xì)胞上, 不易辨認(rèn)影響讀片效果。如染色太淺, 可按照原來步驟重染。在用自來水沖洗時(shí)要緩慢沖洗, 使染色液沉渣及染色粒浮去, 使其充分起分色作用, 去除細(xì)胞染色中浮色, 顯示出胞核結(jié)構(gòu)及細(xì)胞清晰形態(tài)、待干、鏡檢。涂片如有色渣, 可用三種方法清除: 一是再加伊紅- 甲基藍(lán)染液于涂片上, 略加擺動(dòng), 使色渣溶于甲醇中, 待甲醇揮發(fā), 加蒸餾水或緩沖液。二是把血片放水槽中, 保持水平, 色渣即從玻片邊緣溢出。三是把血片呈 45°傾斜, 吸 95% 酒精徐徐滴涂片面, 至流下酒精變藍(lán)后, 清水沖凈晾干。涂片如有香柏油, 用擦鏡紙擦去仍可用酒精處理。判斷染液是否起到了染色的作用, 可在沖洗染色液前觀察染液有無一層黃色的金屬光澤, 如果沒有, 則表示染色失敗。

5 檢驗(yàn)人員的素質(zhì)

在制作高質(zhì)量血膜片的同時(shí)需要檢驗(yàn)人員具有扎實(shí)的基本功和豐富的工作經(jīng)驗(yàn). 對(duì)各種細(xì)胞的正常形態(tài)及細(xì)胞形態(tài)的特異性改變要熟練的掌握, 同時(shí)對(duì)不同的細(xì)胞在血膜大致分布要清楚的認(rèn)識(shí), 對(duì)一張不滿意的血片要分析判斷找出失敗的愿因. 周圍血涂片檢查通常包括以下幾項(xiàng)。

紅細(xì)胞形態(tài): 紅細(xì)胞大小和血紅蛋白含量改變: 小紅細(xì)胞、大紅細(xì)胞、巨紅細(xì)胞、紅細(xì)胞大小不均、低色素、正色素、多嗜色性。紅細(xì)胞形態(tài)改變: 靶形紅細(xì)胞、球形紅細(xì)胞、橢圓形紅細(xì)胞,

口形紅細(xì)胞、鐮形紅細(xì)胞、畸形紅細(xì)胞。紅細(xì)胞中的異常結(jié)構(gòu):包 括 堿 性 點(diǎn) 彩 紅 細(xì) 胞、How ell - Jo lly 小 體、Cabots 環(huán),Pa ppenheimer 小體等。

粒細(xì)胞形態(tài): 粒細(xì)胞有無中毒性變化, 如中毒顆粒、空泡變性、核凝集、核溶解、Po hhe 小體。中性粒細(xì)胞有無核左移、核右移甚至分葉過多現(xiàn)象。涂片中有無異常細(xì)胞和幼稚細(xì)胞, 如白血病細(xì)胞及其形態(tài)變化( 如 Auer 小體) 、異常淋巴細(xì)胞、胞體巨大分葉過多的中性粒細(xì)胞, 有無 Pelg er- Huet 核異常, 漿內(nèi)含 Alder- Reilly 體或 Chediak- Hig ashi 顆粒等。

血小板形態(tài): 觀察其大小、顆粒的分布, 是否成簇成堆分布, 尋找有無巨大血小板及小巨核細(xì)胞。因此, 一張好的血涂片從清洗到制作、染色每一個(gè)環(huán)節(jié)都要細(xì)致, 耐心任任真真完成每一個(gè)環(huán)節(jié), 這樣才能更好地觀察細(xì)胞形態(tài)為臨床醫(yī)生提供可靠、真實(shí)的檢驗(yàn)報(bào)告, 更好地為臨床服務(wù)。

來源：中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)網(wǎng) （原文網(wǎng)址見本文“閱讀原文”）

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